培养基配制好后，必须立即灭菌，因为如果长时间不进行灭菌，培养料内的微生物就会在料内发酵生长，从而破坏培养基内的营养成分，并且由于这些微生物的生长过程中分分泌一种或多种毒素从而抑制好菌的生长。
培养基灭菌的时间和温度按各培养基规定进行，以保证灭菌效果和不损坏培养基的必要成分。培养基经灭菌后，可放在37恒温箱培养24小时，无菌者方可使用，在实验室里用得最多的加热灭菌法是高压蒸汽灭菌和干热灭菌。目的都是使细菌体内蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
扩展资料
制备培养基的注意事项：
1、在制备培养基的过程中，器皿在使用前都要根据不同的情况，经过一定的处理，洗刷干净。有的还要进行包装，经过灭菌等准备就绪后，才能使用。
2、同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此，除所用的是标准方法，应严格按其规定进行配制外，一般均应尽量收集有关资料，加以比较核对，再依据自己的使用目的，加以选用，记录其来源。
3、培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱，最好一次完成，不要中断。
4、培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。最好使用不锈钢锅加热溶化，可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。
