tlc中 硅胶色谱怎么选择合适的溶剂 实现快速分离

2020-06-25 文化 228阅读
结晶
需要掌握结晶溶剂选择般原则及判定结晶纯度
结晶溶剂选择般原则:欲离热溶解度冷溶解度;杂质冷热都溶或冷热都易溶沸点要适宜高或低乙醚宜用
判定结晶纯度:理化性质均;固体化合物熔距
≤ 2℃;TLC或PC展呈单斑点;HPLC或GC析呈单峰
沉淀
通4条途径实现:
1)通改变溶剂极性改变溶解度见水提醇沉(沉淀糖、蛋白质)、醇提水沉(沉淀树脂、叶绿素)、醇提乙醚或丙酮沉淀(沉淀皂苷)等
2)通改变溶剂强度改变溶解度使用较盐析即药水提液加入定量机盐使某些水溶性溶解度降低沉淀
3)通改变溶剂pH值改变存状态适用于酸性、碱性或两性亲脂性离离碱性酸提碱沉离酸性碱提酸沉
4) 通加入某种试剂与欲离难溶性复合物或化合物铅盐沉淀(包括性醋酸铅或碱式醋酸铅)、雷氏盐沉淀(离水溶性物碱)、胆甾醇沉淀(离甾体皂苷)等
萃取包括:
1.液-液萃取选择两种相互能任意混溶溶剂通种水另种石油醚、乙醚、氯仿、乙酸乙酯或丁醇等待离混合物混悬于水置液漏斗加适极性机溶剂振摇放置取机相或水相即极性同离离难易取决于两种物质同溶剂系统配系数比值即离离愈愈离
2.纸色谱(PC)属于配色谱用于糖检识、鉴定亦用于物碱色谱鉴别等
3.配柱色谱相色谱与反相色谱相色谱固定相极性流相极性用于离水溶性或极性较反相色谱与相反适宜离脂溶性化合物
根据量用:
1.透析适用于水溶性(蛋白质、肽、糖)与(氨基酸、单糖、机盐)离
2.凝胶滤称凝胶渗透色谱、筛滤、排阻色谱离混合物各组按由顺序先流并离用凝胶葡聚糖凝胶(Sephadex G)羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)前者适于水应用者既水应用机溶剂应用离混合物既筛作用吸附作用离游离黄酮主要靠吸附作用;离黄酮苷则筛性质起主导作用
3.超滤
4.超速离
吸附包括
1)硅胶吸附色谱
硅胶极性吸附剂吸附力取决于离物质极性(极性越吸附力越强)洗脱溶剂极性(溶剂极性越弱硅胶离物质吸附能力越强)用硅胶吸附色谱离组极性同混合物极性物质吸附力洗脱慢;洗脱溶剂极性增洗脱能力增强洗脱速度加快另外硅胶定酸性用其离碱性需注意
2)氧化铝吸附色谱
氧化铝亦极性吸附剂其吸附规律与硅胶相似同氧化铝定碱性且具铝离用其离些酸性或酚性易产逆吸附能溶剂洗脱蒽醌类、黄酮类(葛根异黄酮除外)离般选择氧化铝
3)性炭吸附色谱
性炭非极性吸附剂其吸附规律与硅胶、氧化铝恰相反非极性物质具较强亲力水物质表现强吸附能力用于水溶液脱色素用于糖、环烯醚萜苷离纯化等
4)聚酰胺吸附色谱
聚酰胺吸附属于氢键吸附系通其众酰胺羰基与酚类、黄酮类化合物酚羟基或酰胺键游离胺基与醌类、脂肪羧酸羰基形氢键缔合产吸附聚酰胺吸附色谱特别适合离酚类、醌类黄酮类化合物聚酰胺离物质吸附力取决于离物质结构与聚酰胺形氢键缔合基团数目及氢键作用强度同溶剂影响聚酰胺离物质吸附表现各种溶剂聚酰胺吸附色谱洗脱能力其由弱强致顺序水、甲醇、丙酮、氢氧化钠水溶液等
5)孔吸附树脂吸附色谱
孔吸附树脂同具吸附性筛性般非极性化合物水易非极性树脂吸附极性物质水易极性树脂吸附物质溶剂溶解度树脂物质吸附力反非极性孔吸附树脂说洗脱溶剂极性越洗脱能力越强该用于皂苷类纯化离
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