设计实验排查一下该抗体没有生物学活性的原因。
抗体无活性，首先可以从蛋白质的结构去入手思考（一级结构和空间构象），先用X晶体衍射技术探查蛋白质空间结构是否异常，再用Western 蛋白免疫印迹法分析目标蛋白是否与抗原特异结合。（先用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，分离不同分子量大小亚基或多肽，再转膜到固体载体，把此亚基作为抗体特异性固定，再用一抗原与抗体结合，洗脱后再用标记的二抗特异性结合，显色观察，看是否具有活性。如若没有之后再检测蛋白质的一级结构，用Edman测序实验，如若目标蛋白质分子量比较大，可先用多种氨基肽酶水解，再找出重叠序列，分析蛋白质的一级结构。当然也可以从基因角度去入手，比如目标基因是否载入质粒后发生突变，用Southern印迹杂交技术，也是跑电泳分离，转膜，杂交，显色检测等步骤（先用特异性核酸内切酶将DNA切断，不然太长，只有一条，分离不到目标基因，哈哈哈。）如若没问题，可能是蛋白质选择性表达问题目标基因未转录，可以设计实验检测mRNA表达水平，利Oligo（dT）-纤维素层析电泳，先高浓度盐做洗脱液再低浓度洗脱mRNA，利用真核细胞mRNA大都有Poly（A）+结构，与之特异性结合，分离mRNA。再用琼脂糖凝胶电泳跑泳分离目标mRNA，再用Northern 印迹杂交，也是差不多步骤，跑电泳，转移到尼古膜上，与生物素标记的DNA或RNA特异性杂交，检测分析。好了，应该20分应该差不多可以拿到十五十六分了把，昨天晚上因为正好我也在想这个问题，哈哈哈，希望你能考上，我也能考上！加油！
