70乙醇沉淀DNA和异丙醇沉淀DNA的区别

2020-07-27 社会 1134阅读
0.5-1倍体积的异丙醇可以选择性的沉淀DNA和大分子rRNA和mRNA,但是对5SRNA,tRNA以及多糖等不产生沉淀。一般不需要等温放置很长时间,其缺点是易使盐类DNA共沉淀,而且异丙醇难以挥发除去。必须用70%乙醇洗涤。
无水乙醇沉淀DNA需要阳离子如Na离子的存在,而且需要1/1O体积的NAAC,并且加2倍体积的无水乙醇,而且沉淀的盐少,易挥发除去。缺点是总体积较大。需在-20放置很长时间,30分钟-1小时。同样需要70%乙醇洗涤。
我个人认为无水乙醇沉淀DNA的效果更好些,DNA在体积较大的条件下可以沉淀的更充分,提取的DNA含的盐离子也很好,而且乙醇也容易挥发去除,纯度相对来说也较好。
两者都适合沉淀线形和闭环的DNA或质粒,因为两者化学性质都是醇类,沉淀原理是相似。
如果你的DNA含量丰富的话,沉淀10min 就足够了,如果含量低,则需要在-20度沉淀30min-2小时。可以不短观察沉淀的量决定沉淀时间。
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