ELISA样品稀释液一般可用PBS或TBS，其PH值一般在7.2-7.4左右，其中会加入一些蛋白成分（比如3%BSA、5%-15%FBS或和二抗同源的血清），其一方面是为了稳定样品中的目的蛋白，另一方面是为了减少非特异性吸附。有的稀释液中还会加入非离子去污剂（如tween-100），也是为了消除非特异性吸附，提高检测的的特异性。
所以若检测试剂的特异性很高，被检测物质较纯，单纯用PBS稀释是可以的。
商品化的试剂盒血清稀释液，往往还加有变色指示剂，该指示剂成分可以和血清中的蛋白或其它成分结合而变色，或者通过加入血清后的PH值变化来变色指示。这是为了更好地区分那些孔加了样，哪些没有，便于检测人员的操作，通常对抗原、抗体反应没有影响。但这些变色指示成分都是有专利保护并且是不公开的，所以这种成分只有去问生产试剂的厂家了。
