第一，就是一切从实际出发。一切从实际出发即从不依人的主观意志为转移的客观实际出发，而不是从“本本”或“原则”出发。这是做到实事求是的基本前提，为此，坚持彻底的唯物主义立场，也要坚持彻底的辩证法，即：要用全面性的观点看问题，了解事实的全面情况，不能孤立地看问题，不能以个别代替整体，以片面代替全面，要用联系和发展的观点看问题，深入研究客观事物的内在矛盾，事物和现象之间的相互联系，把握事物的本质及其发展规律，坚持具体问题具体分析。为了做到一切从实际出发，必须深入实际，作艰苦细致的调查研究工作，把一切从实际出发与解放思想有机统一起来。
第二，实事求是思想路线的第二项基本内容，就是理论联系实际，就是要把马克思列宁主义普遍原理与中国革命和建设的具体实际相结合。这是做到实事求是的根本途径和方法。具体地来说，理论联系实际，一方面是要以马克思列宁主义为指导来正确认识中国的客观实际，并从实际出发来应用马克思列宁主义；另一方面，也是实质性的一方面，就是要在实践中，总结中国革命和建设的实践经验，使之马克思主义化，以中国自己独创性理论来进一步丰富和发展马克思列宁主义。
第三，实事求是思想路线的第三项内容，就是坚持马克思主义的科学实践观，坚持实践是检验真理的唯一标准。毛泽东认为，社会实践活动是人类本质性力量和自觉能动性的突出表现，它是人类社会存在和发展的基础，也是人类社会认识的基础。辩证唯物主义认识论是基于实践的能动的革命的反映论，实践的观点是辩证唯物主义认识论之第一的和基本的观点。毛泽东坚持了马列主义关于实践是检验真理标准的思想，在此基础上进一步强调了实践标准的唯一性。
