一般用测定叶绿素a来表示藻类的含量：
实验14 叶绿素a和b含量的测定（分光光度法）
一、目的
学会Chla、b含量的测定方法，了解叶片中Chla、b的含量。
二、材料用具及仪器药品
菠菜叶片、721分光光度计、天平、研钵、剪刀、容量瓶（25ml）、漏斗、滤纸、乙醇（95%）
三、原理
叶绿素a、b在波长方面的最大吸收峰位于665nm和649nm，同时在该波长时叶绿素a、b的比吸收系数K为已知，我们即可以根据Lambert Beer定律，列出浓度C与光密度D之间的关系式：
D665=83.31Ca+18.60Cb…………………………….(1)
D649=24.54Ca+44.24 Cb…………………………….(2)
(1)(2)式中的D665、D649为叶绿素溶液在波长665nm和649nm时的光密度。
为叶绿素a、b的浓度、单位为每升克数。
82.04、9.27为叶绿素a、b在、在波长665nm时的比吸收系数。
16.75、45.6为叶绿素a、b在、在波长649nm时的比吸收系数。
解方程式(1)(2)，则得 ：
CA=13.7 D665—5.76 D649………………………(3)
CB=25.8 D649—7.6 D665……………………… (4)
G=CA+CB=6.10 D665+20.04 D649………(5)
此时，G为总叶绿素浓度，CA、CB为叶绿素a、b浓度，单位为每升毫克，利用上面（3）（4）（5）式，即可以计算叶绿素a、b及总叶绿素的总含量。
四、方法步骤
1．称取0.1克新鲜叶片，剪碎，放在研钵中，加入乙醇10ml共研磨成匀浆，再加5ml乙醇，过滤，最后将滤液用乙醇定容到25ml。
2．取一光径为1cm的比色杯，注入上述的叶绿素乙醇溶液，另加乙醇注入另一同样规格的比色杯中，作为对照，在721分光光度计下分别以665nm和649nm波长测出该色素液的光密度。
计算结果：
叶绿素a含量（mg/g. FW）=
叶绿素b含量（mg/g.FW）=
叶绿素总量（mg/g.FW）= 见链接
http://sky.scnu.edu.cn/jpkc/zwslx/fenye/jakj/li/shi-yan/14.htm
还有
实验33 叶绿素a和b含量的测定（分光光度法）
原理
如果混合液中的两个组分，它们的光谱吸收峰虽有明显的差异，但吸收曲线彼此又有些重叠，在这种情况下要分别测定两个组分，可根据Lambert—Beer定律，通过代数方法，计算一种组分由于另一种组分存在时对吸光度的影响，最后分别得到两种组分的含量。
如图9叶绿素a和b的吸收光谱曲线，叶绿素a的最大吸收峰在663nm，叶绿素b在645nm，吸收曲线彼此又有重叠。
根据Lambert—Beer定律，最大吸收光谱峰不同的两个组分的混合液，它们的浓度C与吸光度A之间有如下的关系（参阅实验86）：
A1=Ca·ka1+Cb·kb1 (1)
A2=Ca·ka2+Cb·kb2 (2)
式中：Ca为组分a的浓度，g/L。
Cb为组分b的浓度，g/L。
A1为在波长λ1（即组分a的最大吸收峰波长）时，混合液的吸光度A值。
A2为在波长λ2（即组分b的最大吸收峰波长）时，混合液的吸光度A值。
ka1为组分a的比吸收系数，即组分a当浓度为1g/L时，于波长
λ1时的吸光度A值。
kb2为组分b的比吸收系数，即组分b当浓度为1g/L时，于波长λ2时的吸光度A值。
ka2为组分a（浓度为1g/L）在波长λ2时的吸光度A值。
kb1为组分b（浓度为1g/L）在波长λ1时的吸光度A值。
从文献中可以查得叶绿素a和b的80%丙酮溶液，当浓度为1g/L时，比吸收系数k值如下：
将表中数值代入上式(1)、(2)，则得：
A663=82.04×Ca+9.27×Cb
A645=16.75×Ca+45.60×Cb
经过整理之后，即得到下式：
Ca=0.012 7 A663—0.002 69 A645
Cb=0.022 9 A645—0.004 68 A663
如果把Ca，Cb的浓度单位从原来的g/L改为mg/L，则上式可改写为下列形式：
Ca=12.7A663—2.69A645 (3)
Cb=22.9A645—4.68A663 (4)
Ct=Ca+Cb=8.02A663+20.21A645 (5)
(5)式中Ct为总叶绿素浓度，单位为mg/L。
利用上面(3)、(4)、(5)式，即可计算出叶绿素a和b及总叶绿素的浓度。
注：一般大学教学实验室所用的分光光度计多为721型，属低级类型，其单色光的半波宽值要比中级类型的751型大得多，而叶绿素a和b吸收峰的波长相差仅18nm（663—645nm），难以达到精确测定。此外有时还由于仪器本身的标称波长与实际波长不符，测定的正确性就更差了。根据公式计算往往会得到叶绿素a∶b值小于1，这就不很奇怪了。除向学生说明其中原因外，还可以在实验前对仪器的波长进行校正，使标称波长与实际波长一致。校正可用纯的叶绿素a和b进行，分别在波长650—670nm和630梍650nm之间，每隔1—2nm测定叶绿素a或b的吸光度A，以确定叶绿素a和b的吸收峰的波长。如果测得的峰值与文献上的峰值663nm和645nm不同，可按照仪器说明书步骤进行校正，或者更方便的方法可以打开仪器盖子，松动波长刻度盘紧固螺丝，调节刻度盘使波长至正确值，而后旋紧螺丝复原仪器。
为校正仪器波长所需的叶绿素a和b的用量是很少的，用纸层析法很快就能分离制得。取植物叶子约1g，用乙醚提取叶绿体色素，再用毛细管将色素溶液画在3mm厚滤纸上使成一直线，为使分离效果好，一般重复点样一次即可。然后于密闭容器中进行上行层析，溶剂为含0.5%丙醇的石油醚。层析结束，用剪刀小心地剪下蓝绿色的叶绿素a和黄绿色的叶绿素b，注意剪时尽量避开有可能遭污染的色区。最后分别浸于80%丙酮中，洗下叶绿素a和b
http://bio.biox.cn/Biology/200701/20070106230337_25343.shtml
只是说测叶绿素a是常规的表示藻类总量的方法，也有些在线直接测藻类的仪器，你可以搜一下。
