麦克·泰勒（Mac Taylor）：盖瑞·辛尼兹（Gary Sinise）饰演，是CSI团队的领导人，独身(剧中设定他的妻子死于911事件)。曾经在美军海军陆战队服役；他也曾经说过在这世界上最想做的事就是为国家服务，而他的三个理念是：维护国家的荣誉、维护（纽约）这个城市的安全以及维护犯罪调查实验室的公正廉洁。
史黛拉·波纳席拉（Stella Bonasera）探员：美琳娜·卡娜卡瑞迪斯（Melina Kanakaredes）饰演，把自己完全奉献给工作。她常常被叫做「自由女神」，因为她强硬的个性、强烈的决心、以及高度的智慧使然。她是一半希腊、一半意大利血统的孤儿，从小在寄养家庭中长大。她跟麦克是非常好的朋友，总是担心他的生理与心理的状态。她于第七季离开，剧情设定为她成为新奥尔良犯罪实验室的领导人。
丹尼·麦瑟（Danny Messer）探员：卡明·乔文纳佐（Carmine Giovinazzo）饰演，这个角色被认为是影集里最复杂的一个。他在史坦顿岛的一个「意大利黑手党」家庭中被监视着长大（参见「Tanglewood」这一集），有着一套自己的混合道德观（介于违法者与执法者之间）。麦克亲自挑选丹尼加入这个团队，这对后者来说是项荣誉与责任，每天都为他带来不少压力。他生性多疑，不容易相信他人。佛列克探员是他的好友，可以说是他唯一愿意交附信任的人。
(这个人物就是你特别要求的) 薛尔登·霍克（Sheldon Hawkes）医检员：希尔·哈泼（Hill Harper）饰演，天才儿童，才18岁就从大学毕业；24岁获得外科医师执业执照。然而，因无法救回两个病人，从此放弃成为一个外科医生，成为一个医检员。在第2季里，霍克离开解剖室，改而从事现场调查工作.
唐·佛列克（Don Flack）探员：艾迪·卡希尔（Eddie Cahill）饰演，来自一个世代从事执法工作的家族。他是纽约警局旧式办案风格与新时代的CSI之间的桥梁。他是个风趣的重案组探员，但是对嫌犯缺乏耐心。他的办案技巧常常接近法律容许的边界，不过总是蛮有效果的。他与丹尼·麦瑟是好友，总是愿意倾听后者的问题
林赛·梦露（Lindsay Monroe）：安娜·贝尔纳普（Anna Belknap）饰演，鉴识科学家，在艾婷·波恩被解雇之后从蒙大拿州调过来。首次出现是在「Zoo York」这一集。来自中西部的林赛是一名性格爽朗的女孩子，身手矫健，加入不久就完全融入了原来的团队。
乔·唐娜文(Jo Danville)：瑟拉·沃德(Sela Ward)饰演，原FBI犯罪实验室探员。第七季起正式成为纽约犯罪实验室一员，接替被调走的史黛拉的位置，是职位仅次于麦克的副主管。因为有FBI背景，常常为调查带来便利，也因此能够从不同途径了解不同人的小秘密。与同是FBI探员的丈夫离婚后来到纽约，有一儿子和一养女。为人幽默耿直，给人信任感(她是第七季里的演员,把她列出来是因为个人非常喜欢她,有个性,直爽,聪明干练)
席德·汉默贝克（Sid Hammerbeck）医生：罗伯特·乔依（Robert Joy）饰演（第2季起），新来的医检员，他被形容为一个「半路出家的天才」，最近才从厨师专职成医检员。 在第三季中遭遇食物中毒，被史黛拉及时发现并且救了他。在第五季的一次尸检过程中遭遇放射性铊中毒，也抢救脱险。从第五季起成为主角
亚当（Adam Ross）：A.J. Buckley饰演，实验室技师，在班上以第一名毕业。从第五季起成为主角。
杰尼佛·安吉尔（Jessica Angell）：Emmanuelle Vaugier饰演，与佛列克一样是重案组警探，于第三季第一集首次登场，以干练老道的警察手法手法和美丽的外形赢得很多观众的青睐。于第四季与佛列克形成情侣关系，两人却一直很低调，但是他们的关系却几乎人尽皆知。因为她的姓氏Angell与天使（Angel）相近，因此被国内的观众称之为“天使姐姐”。 (她也死,具体在哪一季记得不是太清楚了)
艾婷·波恩（Aiden Burn）探员：凡妮莎·费里托（Vanessa Ferlito）饰演，她土生土长于布鲁克林区，具有可以快速适应新情境的能力。(在第二季里死了)
