医疗器械无菌室

2020-06-19 健康养生 87阅读
北净康华承接净化工程医疗器械无菌室一、医院消毒灭菌效果监测:
1.必要性:
①消毒灭菌效果监测方法专业性强,不检验不知道结果;
②新建病房、新消毒设备、新消毒剂均应做效果监测。
③特殊对象、特殊需要,必做效果监测。如移植术前、ICU病房、危重病人等。
2.科学性:以科学的试验设计、熟练的技术、可靠的结果、确切地分析,得出结果评价。
3.规范性:以权威规范为依据,符合其基本原则要求。如检测时机的确定、标准菌株的选择、标本数、重复次数、实验方法等确立。
二、监测方法的分类:
1、根据检测方法性质分:
①物理方法:测量压力灭菌温度、测量紫外线强度等;
②化学方法:各种化学指示卡;
③生物方法:嗜热/枯草芽孢灭菌效果监测自然菌存活数监测;
2、根据消毒灭菌对象性质分:
①空气消毒:
②表面消毒:
3.根据具体消毒对象分:
①压力蒸汽灭菌:
②各种器械:
③化学消毒剂:
④紫外线灯杀菌效果:
⑤手和皮肤消毒效果:
⑥空气消毒效果:
⑦物体表面消毒效果:
三、必要条件:
1、专业实验室:
2、必备设备器材:
3、选择实验方法:
4、熟练实验技术:
四、卫生部对500张床位以上医院感染管理的质量指标规定:
(1)医院感染率≤10%;灭菌切口感染 ≤0.5%
(2)医院感染的漏报率≤20%;
调查样本量不少于年监测病人数的10%
(3)医院必须对消毒、灭菌效果定期进行监测。
灭菌合格率必须达到100%
(4)使用中的消毒剂、灭菌剂应进行生物和化学监测。消毒剂每季度生物监测1次,细菌含量必须<100cfu/ml,不得检出致病微生物;灭菌剂每月检测1次,不得检出微生物。化学监测应根据消毒、灭菌剂的性能定期监测。
(5)压力蒸气灭菌进行工艺、化学和生物监测。环氧乙烷必须每锅进行工艺监测,每包进行化学监测,每月进行生物监测。压力蒸气锅每天第一锅必须做B-D试验。
(6)紫外线灯强度监测:每季度1次;新灯管30W≥90µW/cm2,旧灯管≥70µW/cm2
(7)胃肠镜等诊疗器材消毒标准不得检出致病微生物;腹腔镜、关节镜等应灭菌处理,不得检出任何微生物。
(8)进入人体组织、血液、器官的医疗用品应灭菌处理,不得检出致病微生物;接触黏膜医疗用品细菌总数≤20cfu/g(或100 cm2);接触皮肤的医疗用品细菌总数≤200cfu/g(或100 cm2),不得检出致病微生物。
(9)母婴同室、婴儿室物体表面和医护人员手不得检出沙门氏菌。
(10)医院各类环境空气、物体表面、医护人员手细菌数标准:
环境 类 别 空气 物体表面 医护人员手
cfu/cm3 cfu/cm2 cfu/cm2
Ⅰ类 层流洁净手术室、 ≤10 ≤5 ≤5
洁净病房
Ⅱ类 普通手术室、产房、 ≤200 ≤5 ≤5
婴儿室、普通隔离病房
Ⅲ类 儿科、妇科检查室、 ≤500 ≤10 ≤10
注射、换药、治疗、
急诊、化验、普通病房
Ⅳ类 传染病科及病房 —— ≤15 ≤15
五、为保证医院消毒灭菌可靠,应认真做好医院消毒灭菌效果监测
1、影响消毒灭菌因素很多,使消毒灭菌效果难以保证。
2、消毒灭菌效果生物监测专业性强,条件难创造,结果评价难度大,实验周期长。
3、化学测试试剂法较复杂,结果准确;试纸法简便易行,但精确度较差。
六、压力蒸汽灭菌效果的监测:
(一)BD试纸:
检查灭菌器工艺状态,并不能反应灭菌器使用中被灭菌物品的实际灭菌效果。发现阳性应进行灭菌器性能检查调试。
(二)指示胶带:
表示是否经过灭菌处理,并不能反应被灭菌物品实际灭菌效果。
(三)化学指示卡:
检测每包被灭菌物品的灭菌效果。建议最好每包被灭菌物品中心放一片化学指示卡,待灭菌处理后,视其变色程度(灭菌效果)决定是否使用。
(四)用生物指示剂作系统监测:
采用生物灭菌指示剂来检查压力蒸汽灭菌效果是最科学、最可靠的监测方法。由中国预防医学科学院流行病微生物研究所,北京鑫四环消毒技术开发中心联合产销的嗜热脂肪杆菌芽孢(SS1,K31)是国际公认的标准菌株。现制成标准菌片,供检查压力蒸汽灭菌效果检测。
w 菌株特点:
1、 该菌为需氧芽孢杆菌,细菌繁殖体G兰氏染色阴性呈紫色,细菌芽胞孔雀绿着色。其细菌繁殖体对培养基要求低,在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨琼脂上生长良好,表面粗糙呈米黄色。
2、最适生长繁殖温度为56–65℃,培养24h即可形成菌落,37℃下24h看不到菌落。
3、 本生物指示剂载体为高级滤纸片,染菌量为5×105–106cfu/片,封装在小纸袋内,热死亡时间为121℃,3.9min阳性,19min阴性;D10值1.3–1.9min,符合美国药典第十一版规定标准。该菌无毒,热抗稳定,在冰箱内4℃下保存一年抗力无明显下降,在常温(20℃左右)可保存1个月。
w 使用方法:
1、 该芽孢菌片使用时将装有菌片的小纸袋放在被灭菌的物品中心部位(每锅放置菌片数按卫生部规定)。
2、 灭菌后,再无菌操作下取出小纸袋中的菌片, 投放到溴甲酚紫培养液管中。同时将未经灭菌的菌片投入另一管培养基中作对照。
3、 56℃–60℃培养,48h观察结果,对照管为米黄色;若灭菌后菌片培养液颜色不变仍为淡紫色,为阴性(–),表示灭菌彻底;如变黄为阳性(+),表示灭菌不彻底。
w 培养基成分和配制方法:
1、成分:胰蛋白胨10g、葡萄糖5g、蒸馏水 1000ml、1.6%溴甲酚紫酒精溶液指示剂1ml。
2、配制方法:
(1)1.6g溴甲酚紫溶于98.4ml的96%酒精溶液中摇匀;
(2)把前三种成分溶解后,调解pH7.0-7.2,加入指示剂摇匀;
(3)每管分装5ml,以121℃20min灭菌后,放4℃冰箱内保存,备用。
w 注意事项:
1、防止指示剂中酒精挥发而使溴甲酚紫含量过高(溴甲酚紫含量过高后可抑菌生长);
2、菌片灭菌后应及时取出培养;
3、禁止菌片接触任何消毒剂及放射源以免影响抗力。
七、化学消毒剂消毒效果监测:
(一)消毒剂有效含量的测试:
1、主要是有效含量不稳定的消毒剂,如过氧 乙酸、含氯消毒剂等应进行含量测试。
2、 化学试剂滴定法较复杂但结果精确;试纸法方便快速,但准确性差。专用测氯试纸——比较准确;复合测试试纸(可同测过氧乙酸、含氯消毒剂)——准确性较差。戊二醛试纸;含碘、臭氧等试纸尚待研究。
(二)化学消毒剂使用溶液污染菌数的检测
1、选好用好中和剂:
2、做到:对应,浓度、比例合适
3、 中和剂选择原则:
①本身对菌无影响
②确能去除杀菌因子
③生成物对菌无影响
④对照完全
★ 试验分组:
① 菌液+药液 培养
②(药+菌液)+中和剂 培养
③ 中和剂+菌液 培养
④(药+中和剂)+菌液 培养
⑤ PBS+菌液 培养
⑥ PBS 培养
⑦ 中和剂 培养
⑧ 培养基 培养
1)方法:
第一步: 用容量为1ml的灭菌吸管,吸取1ml消毒溶液。
第二步:将吸取的1ml样液加入到9ml的稀释液中,这个稀释液的配制成分取决于消毒剂溶液的成分,即在生理盐水溶液中加入合适的中和剂。
浸泡器械用消毒液缸 稀释管 营养琼脂平皿
图1 Kelsey和Maurer提出消毒剂溶液在使用过程中的试验
第三步:
将上述消毒稀释液试管送到实验室,从采样到试验时间不要超过1h,随后用一支50滴/ml量的滴管 (出可用有0.02ml刻度的血清吸管),吸取混合液,在每一个营养琼脂平板表面上(培养基平板表面上已无水分),滴10滴(每滴量为0.02ml),同样滴二个平板。
第四步:
将二个平板分别孵育于二种不同温度的孵箱内;一个放在37℃孵箱内1~2天;另一个平板孵育于20℃左右的室温下3~7天,随后计算二个平板上的菌落数,除以2,即得出每个平板上的平均菌落数。
2)试验结果:
平板培养后有细菌菌落存在,表示消毒溶液中有细菌存在。若一个板上长1~2个菌落,可以忽略,因为消毒剂溶液毕竟是一种化学消毒剂,而不是灭菌剂,因此培养出极少量活菌是属正常。若一个平板上生长5个或5个以上的菌落,则应注意这消毒剂溶液已被污染。从平板上检出菌落数,可以计算出每毫升消毒溶液中存在的细菌数,其计算方法如下:
◆ 由于消毒样液是按1:10稀释,用50滴/ml的滴管滴10滴。如果10滴的消毒剂/稀释液混合液生长了5个菌落,可计算出1ml消毒溶液中存在250个活菌。换句话说,在一个板上滴上10滴,它是1ml的1/5,因此计算如下:
5(一个平板上长菌落总数)×10(用消毒液稀释10倍)×5(在平板滴10滴,只占消毒剂/稀释液混合液的1/5)=250个菌。
5×10×1=100个菌,即每毫升消毒液中存在的细菌数。若一个平板上长20个菌落,则每毫升消毒液中有5×10×5=250个细菌,这样多的细菌,说明此消毒剂溶液已经失效,不能再使用
(见图2)
图2 平板上细菌的污染情况
每滴上各有少数菌落表示不能继续使用
每滴上存在许多菌落表示严重污染
3)消毒剂溶液中长菌的原因:
消毒剂溶液中长菌,常见有下列几种原因:
①容器没有洗净,未经加热消毒处理。
②配制消毒剂溶液时,消毒剂和水量不准确, 使消毒浓度过低不能杀死细菌或抑制细菌。
③消毒剂溶液贮存过久,已经失效。
④由于过多的有机物质在消毒剂溶液中,消耗消毒剂而使消毒剂失效。
⑤在消毒剂溶液中存在着各种抑制消毒剂物质。
八、医疗器械灭菌效果的检测:
采样时间;在灭菌处理后,存放有效期内采样。
(一)常规监测
1、检测方法:缝合针、针头、手术刀片等件医疗器械各5件,分别投入5ml的无菌洗脱液中。注射器则取5副在5ml无菌肉汤中分别抽吸5次。手术钳、镊子等大的医疗器械取2件,用棉拭子反复涂擦采样,将棉拭子投入5ml无菌洗脱液中。振打80次,吸取1ml 接种平皿做活菌计数, 37℃培养48h,计算菌落数。
2、结果判定:平板上无菌生长为灭菌合格。
3、注意事项:若消毒因子为化学消毒剂时,
采样液中应加入相应的中和剂。
(二)无菌检验
1、无菌检验前准备
(1)洗脱液与培养基无菌检验:无菌试验前3天,于需-厌氧培养基中各接种1ml 洗脱液,分别至30~35℃与20~25℃培养72h,应无菌生长。
(2)阳性对照管菌液制备:试验前一天取金黄色葡萄球菌(CMCC 26003)新鲜培养物,接种1环至需-厌氧培养基内,在30~35℃培养16~18h,用0.9%无菌氯化钠溶液稀释10cfu/ml备用。取生孢梭菌(CMCC 6494)的需氧菌、厌氧菌培养基新鲜培养物1环接种于相同培养基内,30~35℃培养16~18h,用0.9%无菌氯化钠溶液稀释10cfu/ml备用。取白色念珠菌(CMCC 98001)真菌琼脂培养基斜面新鲜培养物1环,接种于相同培养基内,20~25℃培养24h,用0.9%无菌氯化钠溶液稀释10cfu/ml~10cfu/ml备用。
2、无菌操作:
(1)取缝合针、针头、刀片等小件医疗器械5件直 接侵入6管需--厌氧培养管(其中1管作阳性对照)与4管霉菌培养管。培养基用量为15ml/管。
(2)取5副注射器,在5ml洗脱液中反复抽吸5次, 接种需-厌氧培养管(6管,其中1管作阳性对照)与霉菌培养管(共4管)。接种量:1ml注射器为0.5ml,2ml注射器为1ml,5~10ml注射器为2ml,20~50ml注射器为5ml,培养 基用量为2ml以下为15ml/管,接种量5ml为40ml/管。
(3)手术钳、镊子等大件医疗器械取2件用棉拭子涂擦采样,投入5ml无菌洗脱液中,接种于需-厌氧培养管(6管,其中1管作阳性对照)与霉菌培养管(共4管)。接种量为1ml/管,培养基用量为15ml/管。
3、培养:将需-厌氧培养管以及阳性与阴性对照管均于30~35℃培养5天。霉菌培养 管与阴性对照管于20~25℃培养7天。
4、结果判定:阳性对照在24h内应有菌生长,阴性对照无菌生长,需-厌氧培养管及霉菌培养管无菌生长,可判为灭菌合格。
★ 如需-厌氧培养管及霉菌培养管中任何1管显混浊并证明有菌生长,应重新取样,分别复测2次,如各管无菌生长仍可判为灭菌合格。
5、注意事项:
(1)在洁净度100级区域中进行,严格无菌操作。
(2)采样后送检时间不得超过6h,样品保存于4℃,则不超过24h。
(3)如消毒因子为消毒剂,采样液中应加入中和剂。
(4)采样面积,100cm2。
(5)设好阳性、阴性对照。
九、手和皮肤消毒效果检测:
1、采样时间,在消毒后立即采样。
2、采样方法
(1)手,手曲面手指跟到手指端(一只手约30cm2),采样液10ml。
(2)皮肤,5cm×5cm 。采样液10ml。
3、检验方法
取1ml采样液做活菌计数,37℃培养48h。
4、采样结果计算:
平板上菌落数 X 稀释倍数
细菌总数(cfu/cm2)= ---------------------------------
采样面积(cm2)
5、结果判定:
(1)I、II类区域工作人员,细菌总数 ≤5cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。
(2)III类区域工作人员,细菌总数≤10cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。
(3)IV类区域工作人员,细菌总数≤15cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。
●母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的工作人员,不得检出沙门氏菌及其他致病菌。
6、注意事项:
(1)采样器材应无菌。
(2)采样液中应含相应的中和剂。
(3)阳性对照的设定问题。
(4)消毒时间要求,外科手消毒3分钟、卫生手消毒1分钟,皮肤消毒5分钟。
十、物体表面消毒效果监测
1、采样时间:消毒处理后采样。
2、采样方法
用5cm×5cm灭菌规格板,采样面积≥100 cm2。门把手等不规则表面直接用棉拭子采样。
3、采样液10ml(含中和剂)。
4、检验方法:同上
5、结果判定:
(1)I、II类区域,细菌总数≤5cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。
(2)III类区域,细菌总数≤10cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。
(3)IV类区域,细菌总数≤15cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面,不得检出沙门氏菌。
十一、空气消毒效果监测
1、采样时间:消毒后、操作前进行采样。
2、采样方法:
(1)布点:
室内面积≤30 m2,设内、中、外对角线3点,内外点距墙1m;室内面积 >30 m2,设四角及中央5点,四角点距墙1m。
(2)平板暴露法
平板直径9cm、采样高度1.5m,暴露5min。
3、检验方法
平板37℃培养48h。计数菌落数并分离致病菌。
4、平板暴露法结果计算
50000N
细菌总数(cfu/m3)= --------------------
A×T
A为平板面积(cm2); T 为暴露时间(min);N 为平均菌落数(cfu)
5、结果判定
(1)I、II类区域,细菌总数≤10cfu/cm3,并未检出致病菌为消毒合格。
(2)III类区域,细菌总数≤200cfu/cm3,并未检出致病菌为消毒合格。
(3)IV类区域,细菌总数≤500cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。
6、注意事项:采样前关好门窗,在无人走动的情况下,静止10min 进行采样。
十二、紫外线灯管强度的检测:
1、紫外线是不可见光,紫光≠杀菌。
2、紫外线直射、折射。
3、紫外线穿透力弱。
4、杀菌紫外线为C波段,中心波长2537AO
5、紫外线杀菌剂量:强度 X 时间
6、检测紫外线灯管强度的方法:紫外线强度仪;紫外线强度指示卡
7、紫外线灯管的质量:玻璃无气泡、气线;启动快;不闪动;寿命长;照射强度标准:30W灯管新灯≥90µW/cm2;旧灯≥70µW/cm2
8、紫外线强度测试距灯光垂直100cm照射直接读强度值。
注意:①作好防护:戴眼镜、手套,必要时戴防护面罩。
②紫外灯管开启后稳定5分钟后,读测试数值。
③紫外线强度变化与灯管质量电压,反光罩光洁度等有关。
十三、几点信息和看法:
1、对消毒技术和方法的评价问题:
1)含氯消毒剂的更替;
2)戊二醛和邻苯二甲醛;
3)动态消毒机的效果评价;
4)臭氧消毒的优缺点(氧化作用突出);
5)空气和表面消毒相结合;
◆消毒是积极的治疗,对任何人都是必不可少的!
◆健康的生命才是最宝贵的!
◆为了保护健康和生命,让我们共同为发展消毒事业而努力!
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