江户川柯南 声优：高山南原为工藤新一 声优：山口胜平/高山南（幼年期） 帝丹高中二年级B班学生，高中生侦探，被称为“平成年代的福尔摩斯”、“日本警察的救世主”，很多案件在他的活跃之下得以侦破。后来被黑衣组织灌下毒药，身体变小。 毛利兰 声优：山崎和佳奈 本故事的女主角。帝丹高中二年级B班学生，毛利小五郎的女儿，空手道社的主将。和新一是从小一起长大的青梅竹马，喜欢新一。 毛利小五郎 声优：神谷明→小山力也 小兰的父亲。曾经是警察，后来改行做了私家侦探。多数时候是头脑迷糊的糊涂侦探，需要借助柯南的力量才能破案，但是一旦遇到牵涉到和自己有关的人的案子，就会表现出惊人的推理能力。擅长柔道。
阿笠研究所
阿笠博士 声优：绪方贤一/田中一成（少年期） 新一的邻居，发明家。和工藤优作是好友。曾经有过不少发明，不过大多数是失败作品。新一变小成为柯南后，为了帮助柯南而发明了很多有用的道具。 灰原哀 声优：林原惠美 帝丹小学一年级B班学生。真实身份是黑衣组织成员·宫野志保（组织代号：雪莉），后来因姐姐明美被杀，拒绝与组织合作而被囚禁，为此服下APTX4869而使身体变小，之后住在阿笠博士家，并在后来成为少年侦探团成员。
