Westernblot中Tween-20的作用是什么?应该怎么用

2022-04-20 健康养生 149阅读

1、Tween-20是一种非离子型表面活性剂。用途为水包油乳化剂、可用作溶剂、扩散剂、稳定剂、润滑剂和抗静电剂等。气相色谱固定液(最高使用温度120℃)分离分析挥发油、脂肪酸酯、醇、酮和卤化物。

2、Tween-20有复性抗原的作用,可提高特异性的识别能力。在做westernblot时,用惰性蛋白质或非离子去污剂封闭膜上的未结合位点可以降低抗体的非特异性结合。

封闭剂应该封闭所有未结合位点而不替换膜上的靶蛋白、不结合靶蛋白的标位、也不与抗体或检测试剂有交叉反应。

3、Tween20清除去污剂,而且浓度不要超过0.3%(0.05%效果最好),如果牛奶封闭效果不好可以提高吐温浓度。

在WB洗液里的吐温是和BSA一样,对抗原抗体蛋白提供保护作用,同时因为是表面活性剂(司盘加成亲水的环氧乙烷基团后的化合物),可以减少抗体对抗原的非特异性作用,用于洗脱未结合的抗体、减少非特异性结合。

Tween-20是我们用TBST的时候Tween-20的用量是0.5ml/L,不加SDS。

扩展资料

WesternBlot一般指蛋白质印迹法

它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。

参考资料来源:百度百科:蛋白质印迹法(WesternBlot)

参考资料来源:百度百科:Tween20

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