分子印迹技术的基本概况

2022-03-29 科技 132阅读

Southern在1975年首先提出了分子印渍的概念。他将琼脂糖凝胶电泳分离的DNA片段在凝胶中进行变性使其成为单链,然后将一张硝酸纤维素(nitrocellulose,NC)膜放在凝胶上,上面放上吸水纸巾,利用毛细管作用原理使凝胶中的DNA片段转移到NC膜上,使之成为固相化分子。载有DNA单链分子的NC膜就可以在杂交液与另一种带有标记的DNA或RNA分子(即探针)进行杂交,具有互补序列的RNA或DNA结合到存在于NC膜的DNA分子上,经放射自显影或其他检测技术就可以显现出杂交分子的区带。由于这种技术类似于用吸墨纸吸收纸张上的墨迹,因此称为“blotting”,译为“印迹技术”。
生物大分子印迹技术发展极为迅速,己广泛用于DNA、RNA、蛋白质的检测。通常人们将DNA印迹技术称为Southernblotting,将RNA印迹技术称为Northernblotting,将蛋白质印迹技术称为Westernblotting,将不经凝胶的印迹技术称为斑点印迹(Dotblotting)。

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