固定：手执玻片一端，让菌膜朝上，通过火焰2～3次固定，以不烫手为宜(温度高就烤变形了或者烤断了或者烤成碳了，后面要冲洗，不固定就冲走了啊，我的哥)
结晶紫初染色：将玻片置于废液缸玻片搁架上，加适量的结晶紫染色液染色1min，以盖满细菌涂面为宜。之后倾去染色液，用水小心地冲洗。
碘液媒染：滴加卢哥氏碘液，媒染1min后用水洗去碘液
脱色：将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇，脱色20～25s至流出液无色，立即水洗
（注意煤染和脱色的时间，不按要求就搞砸了）
复染：滴加蕃红复染2～5min，然后用水洗去涂片上的番红染色液。
晾干：将染好的涂片放空气中晾干或者用吸水纸吸干。
镜检：镜检时先用低倍，再用高倍，最后用油镜观察，并判断菌体的革兰氏染色反应性。
（G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。
G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色，呈现蓝紫色。）
现在的随油镜便你怎么用都不容易坏，只要你不怕把载玻片弄破
要记得用二甲苯擦镜头上的香柏油，要不然下次什么都看不到
注意：
在实验中经常会出现假阳性和假阴性的结果，假阳性主要是由于脱色不完全，可能是由于涂片过厚，或者是结晶紫染色过度，导致脱色不完全。假阴性可能是因为细胞固定过度，造成细胞壁通透性的改变，而出现假阴性结果；另外，细胞培养时间太长，可能已经有部分细胞发生死亡或者自溶，也导致细胞壁通透性的改变而出现假阴性结果。
这都百度找的，你不动脑筋啊
